Akt 控制细胞提取物 |细胞信号技术

来自 : 发布时间：2024-05-14

class=\"container-fluid\">支持数据相关产品产品使用方案BackgroundPathwaysCitations & ReviewsOn Page MenuProductsExperimental ControlsAkt Control Cell ExtractsAkt Control Cell Extracts#9273Reviews ()Citations (0)Filter:WB对 Jurkat 细胞、Calyculin A 或 LY294002 处理的提取物进行蛋白质印迹分析，使用 Phospho-Akt (Ser473) Antibody #9271（上）、Phospho-Akt (Thr308) Antibody # 9275（中）或 Akt Antibody # 9272（下）。显示更少显示更多图片库详细了解我们如何获取图像 × Akt控制细胞提取物 9273 在暗模式和亮模式之间切换 Filter:WB Western blot 分析使用 Phospho-Akt (Ser473) Antibody #9271（上图）、Phospho-Akt (Thr308) Antibody #9275（中图）或 Akt Antibody #9272（下图）处理的 Jurkat 细胞提取物，Calyculin A 或 LY294002。相关产品

产品信息

产品使用信息

使用前先煮沸 3 分钟。每条泳道加载 20 µl 磷酸化和非磷酸化 Akt 提取物。

存储在 SDS 样品缓冲液中：62.5 mM Tris-HCl（25°C 时 pH 6.8）、2% w/v SDS、10% 甘油、50 mM DTT , 0.01% w/v 溴酚蓝或酚红。储存于 –20°C，或长期储存于 –80°C。产品说明磷酸化 Akt 细胞提取物：来自 Jurkat 细胞的总细胞提取物，血清饥饿过夜，然后处理与 Calyculin A (CST #9902) 一起保存其激活的 Akt 状态，作为阳性对照。在 SDS 样品缓冲液中提供。非磷酸化 Akt 细胞提取物：来自 Jurkat 细胞的总细胞提取物，血清饥饿过夜，然后用 50 µM LY294002 (CST #99) 处理01) 1小时，作为阴性对照。在 SDS 样品缓冲液中提供。背景

Akt，也称为 PKB 或 Rac，在控制存活和细胞凋亡中起着关键作用 (1-3)。这种蛋白激酶被胰岛素和各种生长和存活因子激活，在涉及 PI3 激酶的渥曼青霉素敏感通路中发挥作用 (2,3)。 Akt 通过磷脂结合和 PDK1 (4) 在 Thr308 处的激活环磷酸化以及通过在羧基末端在 Ser473 处的磷酸化来激活。之前难以捉摸的负责 Akt 在 Ser473 位点磷酸化的 PDK2 已被鉴定为雷帕霉素 (mTOR) 的哺乳动物靶标，与 rictor 和 Sin1 形成雷帕霉素不敏感复合物 (5,6)。 Akt 通过磷酸化和失活多个靶标来抑制细胞凋亡，从而促进细胞存活，这些靶标包括 Bad (7)、叉头转录因子 (8)、c-Raf (9) 和 caspase-9。 PTEN 磷酸酶是 PI3K/Akt 信号通路的主要负调节因子 (10)。 LY294002 是一种特异性 PI3 激酶抑制剂 (11)。 Akt 的另一个重要功能是通过 GSK-3α 和 β 的磷酸化和失活来调节糖原合成 (12,13)​​。 Akt 也可能在葡萄糖转运的胰岛素刺激中发挥作用 (12)。除了在存活和糖原合成中的作用外，Akt 还通过阻止 GSK-3β 介导的细胞周期蛋白 D1 (14) 磷酸化和降解以及通过负向调节细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p27 Kip1 (15) 和p21 Waf1/Cip1 (16)。 Akt 还通过直接磷酸化含有 raptor 的雷帕霉素敏感复合物中的 mTOR，在细胞生长中发挥关键作用 (17)。更重要的是，Akt 磷酸化和失活块蛋白 (TSC2)，一种 mTOR-raptor 复合体中的 mTOR 抑制剂 (18,19)。

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